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本书由美国冷泉港实验室出版社组织国际权威实验室的专家共同研讨并撰稿，是对其10年前广受赞誉的第一版的全新修订。全书共8篇，分别介绍了PCR方法(包括RT-PCR方法)基本原理，样品制备，引物设计，PCR产物的检测，PCR介导的克隆，PCR法制备突变体，以及利用PCR进行基因的差异表达分析，RNA样品的PCR方法等。书后还附有方便实用的附录和索引。 对于分子生物学、生物化学、遗传学、免疫学、细胞生物学、医学等生命科学基础学科以及分子流行病学、临床检验、法医鉴定等应用领域，无论是PCR的初学者，还是有经验的科研人员，都将会发现这本手册是一部详尽、可靠的实验指南。 |
| 1第1篇pcr导论 1建立一个pcr实验室 2pcr残留污染的处理：一种酶学策略 3高保真pcr酶 4pcr的最优化和常见问题解析 5富含gc片段的pcr扩增 6精确扩增大片段的技巧 7pcr引物设计 8pcr扩增dna的非放射性循环测序 第2篇样品的制备 9dna的纯化 10rna的纯化 11激光捕获微分离技术原位定位基因表达 12克服pcr受抑制的策略 第3篇rtpcr方法 13相对定量rtpcr和竞争定量rtpcr内对照的使用 14四种实时pcr检测系统的比较：biorad icycler、abi 7700、roche lightcycler、the cepheid smartcycler 15定量pcr的新技术 16rna的扩增：用镁激活的热稳定dna聚合酶进行高温反转录和dna扩增 第4篇pcr产物的检测：专门应用 .17杂合性的丢失：一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重pcr方法 18单链构象多态性分析 19逆转录酶原位pcr 20灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法 第5篇用pcr分析基因的差异表达 21pcr在基于微阵列的基因表达分析中的应用 22利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因 23基因表达分析中的荧光mrna差异显示技术 第6篇用pcr进行克隆 24以pcr为基础的文库筛选方法 25经典race（cdna末端快速扩增）法的改进 26用pcr合成和分析dna文库 第7篇pcr产物的克隆 27克隆pcr产物的策略 28pcr产物双向和定向克隆 29核糖克隆：用含有一个核糖核苷酸末端的pcr引物进行dna克隆和基因构建 第8篇利用pcr进行诱变 30诱变pcr 31快速pcr定点突变 32利用pcr来突变和合成新的重组基因 33流线型基因装配pcr 附录1专利 附录2在pcr中使用的寡核苷酸的修饰 附录3注意事项 附录4供应商 索引 |
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