基因工程食品：生产方法与检测技术

.2.1转基因植物的培育方法28
2.1.1转化方法28
2.1.2组培条件30
2.1.3分子条件30
2.2已上市的转基因植物（欧洲、美国、加拿大和日本）34
2.2.1抗除草剂的转基因大豆、玉米、油菜、甜菜、水稻和棉花36
2.2.2抗虫转基因玉米、马铃薯、番茄和棉花38
2.2.3抗病毒、雄性不育、延迟成熟、改变脂肪酸含量等转基因作物40
2.3正在研制的其他转基因植物42
2.3.1增加新的性状42
2.3.2影响人类食品质量的营养性状50
2.3.3影响食品加工的性状53
2.3.4植物制药54
2.4展望57
参考文献58
3利用基因工程酵母和丝状真菌生产发酵食品67
3.1引言67
3.1.1我们为什么要发酵食物67
3.1.2植物来源的发酵类食品68
3.1.3动物来源的发酵类食品68
3.1.4结论70
3.2重组dna技术的应用71
3.2.1重组dna技术在酵母中的应用72
3.2.2重组dna技术在丝状真菌中的应用76
3.3工业用真菌菌株发酵效率的提高79
3.3.1工业用的酿酒酵母菌株80
3.3.2其他工业用酵母菌株87
3.3.3工业用丝状真菌87
3.4基因工程改造生物的商业应用88
3.5前景89
参考文献90
4利用丝状真菌生产食品添加剂96
4.1在食品生产中应用的丝状真菌96
4.1.1工业用途97
4.2食品添加剂100
4.3生产食品添加剂和食品加工助剂的基因工程改造微生物的设计101
4.3.1基因失活102
4.3.2表达载体104
4.4工业用酶的生产过程108
参考文献111
5基因工程细菌在食品发酵生产中的应用前景112
5.1引言112
5.2乳酸菌113
5.2.1乳酸乳球菌乳球亚种和乳脂亚种115
5.2.2乳杆菌115
5.2.3嗜热链球菌115
5.2.4明串珠菌116
5.2.5片球菌116
5.2.6酒球菌117
5.3前景与目标117
5.3.1生物保鲜117
5.3.2噬菌体抗性119
5.3.3胞外多糖121
5.3.4蛋白酶裂解123
5.4乳酸菌的代谢工程124
5.5乳酸菌对逆境的反应125
5.6方法126
5.6.1转化和载体类型126
5.7结论127
参考文献128
第2部分欧洲的立法情况135
6欧洲国家有关基因工程食品的立法现状137
6.1引言137
6.1.1立法的必要性137
6.1.2欧盟新型食品条例是如何出炉的138
6.2现状139
6.2.1新型食品条例139
6.2.2存在的困难149
6.2.3补充和替代条例155
6.2.4与欧盟指令(ec)90/220/eec的关系157
6.2.5德国法律中的补充性法规：新型食品和食品组成成分法定文件(nfi)158
6.3欧盟近来在立法上的一些变化161
6.3.1引言161
6.3.2欧盟委员会建议制定“有关基因工程食物和饲料的欧洲议会及首脑理事会条例”163
6.3.3欧盟委员会建议制定“欧洲议会及欧洲理事会有关基因工程生物追踪检测及标注、对通过基因工程生产出来的食物和饲料进行追踪检测以及修改欧盟指令2001/18/ec之条例”169
6.3.4各立法程序所处的阶段170
参考文献171
第3部分检测方法173
7基因改造生物的检测：需要思考的一些基本问题175
7.1遗传信息由dna转化为表型175
7.2将dna、蛋白质和表型分别作为检测的目标177
7.3食品级的改造180
7.4未知改造的检测181
8基于dna分子的遗传改造检测方法..183
8.1引言183
8.2最新的dna方法学185
8.2.1样品采集程序186
8.2.2dna的提取和纯化186
8.3遗传物质的特异性检测187
8.3.1dna杂交检测技术(dna印迹反应)187
8.4通过pcr方法扩增核酸188
8.4.1普通pcr188
8.4.2实时pcr191
8.4.3从生物信息学角度所做的一些重要思考194
8.5其他类型和比较有希望的一些dna检测技术195
8.5.1热循环程序195
8.5.2等温扩增方法196
8.5.3dna超微检测技术196
8.5.4dna的质谱分析197
8.5.5光子互补检测技术199
8.5.6新型的生物检测方法200
8.6结论以及dna分析方法在检测基因工程生物中的应用前景201
参考文献203
9基因工程鱼及其检测方法207
9.1引言207
9.2转基因鱼的培育与生产208
9.2.1基因表达框架209
9.2.2转基因方法212
9.2.3基因转移和表达成功的依据212
9.3转基因鱼成功生产的一些实例214
9.3.1大西洋鲑鱼214
9.3.2太平洋鲑鱼215
9.3.3罗非鱼(o.hornorum杂种)216
9.3.4罗非鱼(o.niloticum)216
9.3.5鲤鱼217
9.4已加工后的转基因鱼的检测方法217
9.5转基因鱼的食品安全性218
9.5.1基因表达产物219
9.5.2多效作用219
参考文献220
10基因工程改造作物的检测方法223
10.1引言223
10.2植物dna的分离225
10.2.1采样225
10.2.2样品的制备226
10.2.3dna的提取与分析227
10.3检测策略229
10.3.1筛查229
10.3.2特异性检测232
10.3.3定量检测234
10.3.4结果验证235
10.3.5认证236
10.4展望与结论240
参考文献241
11检测多组分和加工类食品中基因工程应用情况的方法243
11.1引言243
11.2在检测多组分和加工类食品中含有的转基因成分时所面临的挑战244
11.3蛋白质和dna的降解246
11.3.1蛋白质246
11.3.2dna247
11.4分析方法249
11.4.1基于蛋白质的分析方法249
11.4.2基于dna的分析方法250
11.5结论267
参考文献268
12乳酸乳球菌的遗传变异及其检测274
12.1引言274
12.2乳酸乳球菌的基因组组成275
12.3乳酸乳球菌基因组的遗传多样性276
12.3.1接合277
12.3.2转导278
12.3.3转化279
12.3.4插入序列和转座子280
12.3.5乳球菌噬菌体是造成细菌遗传可塑性的原因之一281
12.4环境因素和dna代谢过程对乳酸乳球菌变异的影响282
12.5可造成乳酸乳球菌基因组发生突变的方法283
12.5.1乳酸乳球菌的基因工程284
12.6检测乳酸乳球菌基因工程菌的策略288
12.6.1样品的制备289
12.6.2基于dna的分析方法290
12.6.3基于核苷酸序列的分析方法292
12.6.4基于蛋白质的分析方法293
12.7结论296
参考文献297
13食品发酵生产过程中使用的基因工程微生物检测方法300
13.1引言300
13.2微生物的性状302
13.3检测基因工程微生物目前可采用的方法305
13.3.1dna的分离307
13.3.2dna的稳定性308
13.3.3基因工程微生物所属生物种类的特异性检测310
13.4结论312
参考文献...313