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沈立新米钰米钰
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| "本书结合实际研究中摸索出重组蛋白质的分析和分离方法，详细介绍了重组蛋白质的不同性质和不同的分离提取技术，介绍了大规模工业化过程中蛋白质的分离技术，包涵体内蛋白质的分离技术，分泌型蛋白质的分离纯化技术，胞间质蛋白质的分离纯化技术及鉴定手段，对比了各种分离、分析方法之间的优缺点，介绍了如何利用蛋白质工程进行重组蛋白质的修饰以利分离纯化和临床应用。本书可供从事医学、酶学、生物化学、发酵、蛋白质工程等专业人员使用，同时也是从事科研人员的很好参考书。" |
| /第1章重组蛋白分离与分析概论111重组蛋白质概论112重组蛋白质的设计及纯化技巧213纯化目标5131产品的纯度和安全性5132终产物成本514纯化策略615纯化过程的放大716对纯化的综合评价817合理设计纯化工艺8主要参考文献11第2章重组蛋白纯化的一般工艺及方法1421引言1422用做纯化的主要蛋白质性质14221蛋白质大小15222蛋白质形状15223蛋白质荷电性15224蛋白质等电点16225蛋白质疏水性16226蛋白质溶解度16227蛋白质密度16228蛋白质与配体结合能力16229蛋白质与金属螯合能力162210蛋白质的某些特殊性质1723纯化分离技术18231发酵液的预处理18232细胞分离技术20233细胞破碎技术24234生物物质的分离纯化技术2424纯化方案中纯化顺序的选择7625固定相的选择7726方案的有效性分析78主要参考文献79第3章细胞破碎的物理及化学方法8131前言8132破碎率的评价8133破碎方法82331球磨匀浆法83332转子-定子式匀浆机匀浆87333高压匀浆机匀浆90334超声波破碎94335其他物理方法95336细胞自溶98337酶解法101338干燥法102339其他化学溶剂法1033310细胞渗透法1033311通过细胞自身调控体系进行细胞的破碎10434总结104主要参考文献106第4章纯化过程中如何防止蛋白水解10841天然及变性蛋白的水解108411蛋白酶的生化作用108412蛋白酶的种类和蛋白酶的作用机理109413蛋白酶的特异性及对降解底物的敏感性11042用作宿主细胞的真核、原核生物体内的蛋白酶111421大肠杆菌(Ecoli）内的蛋白酶111422枯草杆菌(Bacillussubtilis）产生的蛋白酶112423酵母中的蛋白酶113424哺乳动物细胞内的蛋白酶11543蛋白酶的鉴定11644防止重组蛋白水解的策略117441基因调控法118442去除蛋白酶的策略121443抑制蛋白酶的策略122主要参考文献125第5章从重组蛋白质中除去N末端甲硫氨酸的方法12751引言127511蛋白质转译后的修饰及鉴定分析127512甲硫氨酸氨基肽酶的特性131513胞质间重组蛋白的加工131514与多余甲硫氨酸相关的非均匀性和免疫原性13252去除末端甲硫氨酸的方法133521体内去除末端甲硫氨酸的方法133522去除末端甲硫氨酸的体外方法135主要参考文献137第6章药用蛋白质的纯化14161引言14162蛋白质纯化过程中的质量控制142621蛋白质生物功效142622蛋白质结构143623蛋白质纯度的测定143624终产品中痕量杂质的分析14363蛋白质纯化准则143631初始原料物质的浓度和杂质性质144632非蛋白杂质的去除145633DNA的去除145634热源的去除147635病毒的去除149636外源蛋白的去除15064方案的有效性15165结论152主要参考文献153第7章利用工程修饰改进重组蛋白的纯化分离15771引言15772引入切割位点的重组工程蛋白15873促进活性蛋白分离的工程技术159731形成包涵体以稳定蛋白质160732基团修饰以利天然活性蛋白质生产16274简化纯化工艺的蛋白质工程163741改进色谱性能的蛋白质工程164742构建工程位点使蛋白质具有免疫亲和性能164743构建工程位点使蛋白质具有离子交换吸附性能166744构建工程位点使蛋白质具有金属亲和吸附性能168745低成本纯化蛋白工程171746改进分析方法的蛋白质工程17175结论172主要参考文献173第8章大肠杆菌表达的重组蛋白的分离纯化17581引言17582大肠杆菌表达的分泌型重组蛋白的纯化分离178821纯化方法179822实例180823分泌型重组蛋白的纯化分离总结19983大肠杆菌表达的包涵体蛋白的纯化分离200831确定包涵体量201832重组蛋白稳定性检测204833纯化方案206834包涵体的组成分析210835包涵体的结构214836影响包涵体形成的因素214837包涵体蛋白纯化实例216838包涵体蛋白纯化总结221主要参考文献221第9章酵母表达的重组蛋白的分离纯化22591引论22592酿酒酵母或面包酵母表达的重组蛋白的分离纯化227921酿酒酵母或面包酵母表达的胞内蛋白质的分离纯化228922酿酒酵母或面包酵母分泌表达的蛋白质的分离纯化232923结论234924酿酒酵母或面包酵母表达的重组蛋白的研究展望23593Pichiapastoris生产的重组蛋白的分离纯化235931背景235932Pichiapastoris表达体系的发展236933Ppastoris表达的胞内外源蛋白239934Pichiapastoris分泌的外源蛋白的分离纯化242935讨论248主要参考文献249第10章单克隆抗体的纯化252101引言252102单克隆抗体制备过程253103抗体的物理特征257104单克隆抗体纯化工艺2581041澄清2581042沉淀2601043分离2601044非蛋白杂质的去除271附录鼠源性病毒检测273主要参考文献274 |
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