
| 第一章生物化学实验的基本要求1 第一节实验的准确性1 一、系统误差1 二、偶然误差2 三、操作错误2 第二节实验记录及报告2 一、实验记录2 二、实验报告3 第三节实验样品的制备4 一、动物的脏器4 二、微生物4 三、细胞4 第二章常见的实验方法及基本原理6 第一节透析6 第二节沉淀7 一、蛋白质的特性7 二、常见的蛋白质沉淀方法7 (一)盐析沉淀7 (二)等电点沉淀9 (三)有机溶剂沉淀9 .(四)热沉淀9 (五)其他沉淀10 第三节层析10 一、层析原理10 二、几种常见的层析法11 (一)吸附层析11 (二)分配层析12 (三)薄层层析13 (四)凝胶层析14 (五)离子交换层析15 (六)高效液相色谱16 第四节电泳19 一、电泳法的基本原理19 二、几种常见电泳法21 (一)纸电泳21 (二)醋酸纤维膜电泳21 (三)琼脂糖电泳21 (四)聚丙烯酰胺凝胶电泳22 第五节分光光度法24 一、基本原理24 二、比色法24 三、分光光度法26 四、浊度法26 第六节离心26 第三章普通实验29 实验一实验的基本操作及要求29 实验二糖的颜色反应32 实验三3,5二硝基水杨酸(dns)法测定还原糖34 实验四氨基酸的分离鉴定——纸层析法37 实验五dnscl法测定蛋白质n末端的氨基酸39 实验六离子交换柱层析法分离氨基酸41 实验七有机酸的纸上层析法43 实验八蛋白质性质(一)——蛋白质及氨基酸的呈色反应45 实验九蛋白质性质(二)——蛋白质等电点的测定和沉淀反应51 实验十蛋白质的制备——牛奶中提取酪蛋白56 实验十一总氮量的测定——微量凯氏(microkjeldahl)定氮法58 实验十二folin酚法测定血清白蛋白含量62 实验十三bradford法测定蛋白质的含量63 实验十四紫外分光光度法测定蛋白质的含量65 实验十五血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳66 实验十六菜花(花椰菜)中核酸的分离与鉴定69 实验十七酶的特性71 实验十八多酚氧化酶的制备和化学性质75 实验十九影响多酚氧化酶作用的各种因素78 实验二十碱性蛋白酶活力的测定(福林酚试剂法)79 实验二十一根据底物浓度和酶反应速度之间的关系求米氏常数km82 实验二十二酵母rna的提取及定性和定量鉴定85 实验二十三dna的琼脂糖凝胶电泳88 实验二十四质粒dna的小量制备90 实验二十五氨基转换反应——血清谷丙转氨酶(sgpt)活力的测定 (king氏法)92 实验二十六肌糖原的酵解作用94 第四章综合实验98 实验一sds聚丙烯酰胺凝胶电泳及蛋白印迹98 实验二质粒dna的酶切及连接技术103 实验三重组dna质粒的转化技术105 实验四枯草杆菌碱性磷酸酶的制备及酶活力的测定107 实验五鸡卵类黏蛋白的制备及活力的测定111 实验六pcr基因扩增115 附录118 一、常用仪器的使用118 (一)称量仪器118 (二)分光光度计119 (三)离心机121 (四)干燥箱和恒温箱122 (五)电热恒温水浴122 二、缓冲溶液123 (一)缓冲理论123 (二)常用缓冲液的配制123 (三)ph标定缓冲液的配制126 三、常用的硫酸铵饱和度计算表126 四、层析法常用数据及性质表127 (一)离子交换层析数据及参数127 (二)聚丙烯酰胺凝胶的技术数据129 (三)琼脂糖凝胶的技术参数130 (四)凝胶过滤层析介质的技术参数130 五、分子生物学及基因工程常用数据132 (一)有关核酸的常用数据132 (二)常见限制性内切酶的酶切位点133 (三)酶类135 (四)缓冲液136 (五)与dna凝胶电泳有关的数据138 六、一些常用单位139 (一)长度单位139 (二)体积单位139 (三)质量单位139 (四)摩尔与摩尔浓度表示法140 (五)十进位数量词头及符号140 七、元素的原子量表140 主要参考书目142 |
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