| 姓名：张黎飞著 作者简介： 作品：《细胞免疫学实验研究方法》 姓名：孙黎飞 马琳著 作者简介： 作品：《细胞免疫学实验研究方法》 |
| 第2章 培养器皿的清洗、包装与消毒 在培养免疫细胞的过程中，任何残留在培养器皿上的有害物质（包括微生物、细胞残余物和一些非营养成分的化学物质）都会影响细胞的生长、发育及生物学活性。因此，对首次使用和重新使用的培养器皿都要严格清洗与彻底消毒。 一、培养器皿的清洗 （一）玻璃器皿 培养用玻璃器皿的清洗一般分为以下四个步骤：浸泡、刷洗、浸酸和冲洗。 1．浸泡新购置的玻璃器皿在首次使用前应先用自来水简单刷洗，将附着在其表面的灰尘洗去。然后再用5％稀盐酸浸泡过夜，以中和玻璃培养器皿上的碱性物质。培养用后的玻璃器皿表面含有大量残存的细胞蛋白质，应立即用清水浸泡，以防干结后不易清洗。 2．刷洗将浸泡后的玻璃器皿置入含有10％洗涤剂的塑料盆中，用优质的软毛刷彻底刷洗，再用自来水反复冲洗，刷洗过程尽量不要损害器皿表面的光泽度。 3．浸酸将刷洗完毕的玻璃器皿放入用浓硫酸和重铬酸钾按一定比例配成的清洁液中浸泡过夜。 4．冲洗将浸酸过夜的培养皿用自来水反复、彻底冲洗，并应颠倒冲洗至少10次以上，以防残存的铬离子影响细胞的生长。冲洗完毕，再将培养器皿置入蒸馏水中漂洗、浸泡2～3次，然后置通风、无灰尘处晾干备用。 …… 更多 |
第1章 细胞免疫实验的设施和基本条件／1 第一节 常用无菌操作设施／1 第二节 常用实验室设备与器械／2 第三节 培养免疫细胞常用的器皿／6 第2章 培养器皿的清洗、包装与消毒／9 第3章 细胞培养用液／12 第一节 平衡盐溶液／12 第二节 常用细胞培养基和血清制备／18 第三节 其他常用培养液／20 第4章 制备免疫细胞悬液／22 第一节 实验所需的材料和试剂／22 第二节 制备单个核细胞悬液／23 第三节 去除细胞悬液中的红细胞／25 第四节 去除死细胞的方法／25 第五节 细胞计数／26 第六节 计算细胞活性／27 第5章 分离与纯化免疫细胞／28 第一节 分离人外周血细胞／28 第二节 分离和纯化b淋巴细胞／30 第三节 分离和纯化t淋巴细胞／34 第四节 纯化免疫细胞亚群／36 第五节 分离单核细胞一巨噬细胞／38 第六节 分离和纯化组织中的巨噬细胞／40 第七节 培养树突状细胞的方法／42 第6章 建立免疫细胞克隆／45 第一节 建立特异性t细胞株或t细胞克隆／45 第二节 利用小鼠脾细胞制备t细胞克隆／47 第三节 制备人t细胞克隆／50 第四节 建立人b细胞克隆／53 第五节 筛选单克隆细胞／54 第六节 细胞的培养冻存与复苏方法／55 第7章 造血干细胞的培养技术／58 第一节 配制骨髓细胞培养试剂／59 第二节 分离与纯化骨髓细胞／61 第三节 小鼠骨髓细胞集落形成试验／64 第四节 人骨髓和外周血造血干细胞的培养方法／68 第8章 用流式细胞仪检测免疫细胞／71 第一节 免疫细胞表面分化抗原和黏附分子／71 第二节 流式细胞术常用的染料和标记抗体／74 第三节 选择染色的方法和封闭免疫细胞的fc受体／77 第四节 用流式细胞仪检测免疫细胞表面分子／79 第五节 检测免疫细胞钙离子流入的方法／80 第六节 检测免疫细胞活化的方法／81 第七节 检测免疫细胞周期的方法／83 第9章 免疫细胞的增殖实验／85 第一节 反映dna合成的细胞增殖实验／85 第二节 反映免疫细胞能量代谢的增殖实验／88 第10章 免疫细胞的趋化活性和抗原提呈实验／91 第一节 免疫细胞趋化实验／91 第二节 专职抗原提呈细胞的抗原提呈实验／93 第11章 免疫细胞的细 更多 |
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