| 在实验中，你是否严格遵循标准流程却一无所获7你是否想改进你的工作7你想更多地了解某一研究领域的各种方法吗？或许“实验者”丛书将对你有所帮助。????你能够充分体会到作者饱尝了实验室的挑战带给他们的激动和沮丧。有了这些技巧和诀窍，你的实验成功的几率将更高。但这本颇有价值的实验室手册并非只是一部方法集锦：它为你指明走出实验困境的道路，培养你适时选择正确实验的直觉。它简洁明了地概括了常规方法（例如柱层析、凝胶电泳）的步骤，还列出了不同方法的优缺点。它详细介绍了配体结合实验、抗体生产和微序列分析方面的进展。它论述了一些特殊方法．例如膜蛋白的溶解和重组，糖蛋白分析，或寡聚体蛋白质亚基的确定。其中一节对蛋白质组学进行了导向性说明。????不仅如此，与该系列其他书一样，当你对自己产生了怀疑，不知自已为什么做这一切的时候，这本书以振奋人心的坦诚．引导你走出”灵魂的深夜”。 |
| 前言 第四版前言 致谢 缩略语 1常规技术 1．1缓冲液的配制 1．2蛋白质定量 1．2．1BCA法 1．2．2Bradford法 1．2．3Lowry法 1．2．4Starcher法 1．2．5比色法测定蛋白质的浓度 1．3凝胶电泳 1．3．1SDS凝胶 1．3．2快捷法：无堆积胶的SDS凝胶电泳 1．3．3天然凝胶 1．4凝胶染色 1．4．1固定 1．4．2染色 1．4．3干胶 1．5沉淀和浓缩 1．5．1变性沉淀 1．5．2天然沉淀 1．5．3浓缩 1．6印迹 1．6．1蛋白质印迹显色 1．6．2封闭 1．6．3免疫显色 1．6．4Ca2+结合 1．6．5配体显色 1．7凝胶和印迹的放射自显影 2配体结合 2．1放射性配体标记 2．1．1肽和蛋白质的碘化 2．1．2第二天——碘化过程的问题和对策 2．1．3低分子量分子的碘化 2．1．4碘化组分的纯化 2．1．5碘化法的优点和缺点 2．1．6氚标记 2．2结合 2．2．1膜的分离 2．2．2结合实验 2．2．3膜结合实验 2．2．4膜结合实验的改进 2．2．5可溶性蛋白的结合实验 2．2．6无法结合 2．3结合数据的分析 2．3．1平衡态结合反应 2．3．2动力学 2．4配体交联 2．4．1三组分交联(3C交联) 2．4．2光亲和交联 2．4．3交联实验的对照 2．5结合蛋白的用途 3膜蛋白的溶解 3．1去垢剂 3．1．1名词解释 3．1．2去垢剂的使用 3．2溶解 3．2．1溶解的标准 3．2．2溶解膜蛋白的物理参数 4通过功能测定检测蛋白质 4．1转运体 4．1．1脂质体 4．1．2蛋白脂质体 4．2膜蛋白的重组还原 4．2．1从溶液中重组 4．2．2重组人预先形成的脂质体 4．3通量实验 4．3．1流入检验 4．3．2流出检验 4．4一些建设性的意见 5去除杂质和纯化 5．1纯粹娱乐——蛋白质纯化的过程 5．2常规纯化方法 5．2．1柱层析技术 5．2．2基于分子量差异的纯化 5．2．3基于电荷差异的纯化 5．2．4疏水层析 5．2．5蓝色凝胶 5．3亲和层析 5．3．1凝集素层析 5．3．2配体层析 5．4纯度检验 5．5纯化蛋白的作用 |
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